顯微鏡有好幾種觀(guān)察方式,主要有:
一.明視野觀(guān)察(Bright field BF)
明視野鏡檢是大家比較熟悉的一種鏡檢方式,廣泛應用于病理、檢驗,用于觀(guān)察被染色的切片,所有顯微鏡均能完成此功能。
明視野
二.暗視野觀(guān)察(Dark field DF)
暗視野實(shí)際是暗場(chǎng)照明發(fā)。它的特點(diǎn)和明視野不同,不直接觀(guān)察到照明的光線(xiàn),而觀(guān)察到的是被檢物體反射或衍射的光線(xiàn)。因此,視場(chǎng)成為黑暗的背景,而被檢物體則呈現明亮的象。
暗視野的原理是根據光學(xué)上的丁道爾現象,微塵在強光直射通過(guò)的情況下,人眼不能觀(guān)察,這是因為強光繞射造成的。若把光線(xiàn)斜射它,由于光的反射,微粒似乎增大了體積,為人眼可見(jiàn)。
m..m 暗視野觀(guān)察所需要的特殊附件是暗視野聚光鏡。它的特點(diǎn)是不讓光束由下至上的通過(guò)被檢物體,而是將光線(xiàn)改變途徑,使其斜射向被檢物體,使照明光線(xiàn)不直接進(jìn)入物鏡,利用被檢物體表面反射或衍射光形成的明亮圖象。暗視野觀(guān)察的分辨率遠高于明視野觀(guān)察,高達0.02—0.004
暗視野
三.相差鏡檢法(Phase contrast PH)
在光學(xué)顯微鏡的發(fā)展過(guò)程中,相差鏡檢術(shù)的發(fā)明成功,是近代顯微鏡技術(shù)中的重要成就。我們知道,人眼只能區分光波的波長(cháng)(顏色)和振幅(亮度),對于無(wú)色通明的生物標本,當光線(xiàn)通過(guò)時(shí),波長(cháng)和振幅變化不大,在明場(chǎng)觀(guān)察時(shí)很難觀(guān)察到標本.
相差顯微鏡利用被檢物體的光程之差進(jìn)行鏡檢,也就是有效地利用光的干涉現象,將人眼不可分辨的相位差變?yōu)榭煞直娴恼穹?,即使是無(wú)色透明的物質(zhì)也可成為清晰可見(jiàn)。這大大便利了活體細胞的觀(guān)察,因此相差鏡檢法廣泛應用于倒置顯微鏡。